食蟹猴樣本(PBMC,血漿,血清等)的體外應用簡介

2019-10-17 17:14 嚴國樑
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什么是食蟹猴?


食蟹猴也稱長尾獼猴,是生物醫學研究中常用的非人類靈長類動物(NHP)。成年食蟹猴體長約為40-47厘米,尾長為50-60厘米。雄性食蟹猴體重5-7千克,雌性食蟹猴體重約為3-4千克。因為喜歡在退潮后到海邊覓食螃蟹及貝類,故名食蟹獼猴。

    


   

為什么使用食蟹猴?   


食蟹猴由于與人類有90-93%的遺傳相似性,因為研究人員認為食蟹猴是研究疾病病理學、疫苗開發、免疫學和心臟病學等基礎研究的理想模型。根據FDA指南,食蟹猴也用于制藥行業藥物研發的毒理學和療效研究。    但在食蟹猴體內進行實驗,需要綜合考慮藥物的機理,以最終確定是否在食蟹猴上進行。比如由于食蟹猴缺乏艾滋病進展,因而導致艾滋病毒建模失敗。如開發抗CD28激動劑抗體,在這里,食蟹猴就是比較差的模型,因為他們的CD4+T細胞不表達CD28,因此,毒理學研究中使用的高劑量抗體對食蟹猴是沒有影響的,然而,當將抗體注入人體后會導致細胞因子釋放綜合征,常常會造成致命副作用。    但通過對食蟹猴樣本(如外周單個核細胞PBMC或全血)進行體外研究,研究人員或許能夠對后續的人體體內研究是否有益有所了解。此外,監管機構,包括FDA和EMA建議甚至要求需要這方面的研究數據以評估跨物種反應。   


食蟹猴樣本(PBMC,Serum,Plasma)的體外應用


食蟹猴PBMC可用于研究治療抗體的Fc介導功能,如抗體依賴性細胞毒性實驗(ADCC)。對不同人類抗體亞型在不同細胞類型中的療效的研究表明,人和食蟹猴ADCC的效應細胞相似。因此,可以在食蟹猴的PBMC上驗證ADCC相關實驗。
如果靶分子在細胞上表示,食蟹猴的PBMC也可以用作ADCC測定的靶細胞。Rituximab單抗能夠對表達CD20的食蟹猴B細胞執行ADCC效應。此外,在食蟹猴的體內研究中使用利妥昔單抗時會表現出B細胞耗竭。然而,在進行這些檢測時,必須使用適當的試劑,如對照抗體,以確保觀察到的細胞毒性是抗體/靶向抗原驅動,而不是由一些與人類效應細胞無關的分子驅動。
來自食蟹猴的血清可用于補體依賴性細胞毒性(CDC)測定。CDC 所需的組分蛋白存在于食蟹猴血清中,可用于表達靶抗原的人類靶細胞的CDC檢測。因此,人類治療性抗體可以招募食蟹猴補體蛋白,以促進靶細胞的溶解。
食蟹猴的血清和血漿也經常用于設置基線和生成各種檢測的濃度參考范圍(如細胞因子釋放測量)。同時食蟹猴的血清或血漿也可用作各種檢測的試劑。如ELISA、ELISPOT和WB都是免疫測定,需要初始阻斷以防止非特異性結合,而食蟹猴血清可用于實現這種功能。
   


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