CAR-T的原材料,IO藥物研發的利器——簡要介紹白細胞單采術(Leukopak)

2019-10-17 17:16 嚴國樑
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近幾年隨著腫瘤免疫抗體藥物和過繼性T細胞治療的蓬勃發展,作為最基礎的實驗原材料——免疫細胞收到了越來越多人的關注。


關于PBMC的文章我們這邊其實介紹過很多,其中有一篇比較詳盡的推文系統的介紹了PBMC的方方面面(一文解讀PBMC:藥物研發的最佳搭檔),也有一些推文比較簡略的介紹了組成PBMC的一些亞型細胞的情況,比如T細胞,DC細胞,NK細胞等,感興趣的朋友可以查看我司公眾號歷史記錄。


但在推廣的過程中,我們常常會被問到幾個問題:

1.你們來自一個人的PBMC為什么可以達到這么大的量?

2.抽取這么多細胞不會對人產生嚴重副作用嗎?

3.已經采集這么大量PBMC的捐獻者為什么隔了一兩個月就還能再抽?


很多scientist有這方面的顧慮其實比較正常,因為早期大家都是使用全血來分離PBMC,按照一般的經驗來看,最多采集400cc的全血,那可以拿到的PBMC一般也就是600million左右,而且這樣的捐獻者必須得間隔很長時間(比如6個月)才能再次采集。


因而在大家使用過程中就會遇到一個比較大的問題——實驗的穩定性,由于每個人的免疫系統差異比較大,哪怕是同一個人在不同時間采集的PBMC都存在差異,何論不同人的PBMC。為了有效的解決這個問題,在這里我們就采用了白細胞采集術這種技術。


首先上結論,我們來看兩者的對比:前者是后者的14倍;

    

通過單采得到的PBMC比全血密度梯度離心過程多14倍,且捐獻者可間隔30天重復捐獻,一年最多可捐獻12次,這使其成為大規模研究或臨床前試驗的理想選擇。


那何為白細胞采集術呢,下面我們就來簡單介紹一下:


1、什么是單采血分離術?


白細胞采集術是屬于單采血分離術的一種,單采血分離術簡單的說就是將人的血液在抗凝劑ACD-A存在的情況下在體外循環離心,全血由于密度的不同會分層,因而我們可以提取特定成分,而將其余成分回輸體內,同時在這個過程中,補入提取成分相同體積的生理鹽水,保持人體血液總量不變。這種技術其實發展很多年了,早在1914年就有科學家提出這種設想,希望可以用來治療包括鐮刀狀細胞貧血和某些類型的癌癥在內的疾病。1971年,MD安德森癌癥中心首次使用單采血分離術作為分離外周血干細胞的方法;隨后隨著干細胞動員和冷凍保存方面的突破,使單采血分離術成為外周血干細胞采集的主要方法?,F階段這種技術最常見的用途包括:

1. 采集血漿:用于制備人白蛋白在內的治療性藥物,國內比較知名的如萊士;

2. 采集血小板:常用于手術中,在血站開展;

3. 動員干細胞:常見于干細胞移植;


2、什么是Leukopak(白細胞采集)?


顧名思義,這個就是采集了人體中的白細胞,機器如下圖所示Cobe Spectra。正常成年人白細胞數量為(4.0~10.0)x 109/L,血液總量為4-5L,那我們一次采集最多可以采集多少呢?


這個需要根據捐獻者的身高和體重來進行衡量,根據要求,現有采集Leukopak的捐獻者年齡需大于18周歲,體重需大于50kg,由于國內普遍沒有歐美人胖,因而在美國一般采用3個循環,即15L,國內一般采用1.5-2個循環,即7.5-10L。得到的白細胞總量在7-10*10e9。


    


3、采集這么多,不會對人產生影響嗎?


一次采集相當于提取了一個人1/4~1/2的免疫細胞,但由于中間維持了整體血量的穩定,因而在采集過程中對人的影響比較小。同時此采集是由專業人士進行操作,血站由于是這方面的專業機構,因而是最理想的操作環境,可確保捐獻者的安全。由于在操作過程中需要補入ACD-A抗凝劑,因而捐獻者需要攝入一定量的葡萄糖酸鈣進行中和。最后由于人體的免疫細胞本身的生命周期即為7-14天,因而當采集完畢后,捐獻者能夠很快恢復,這個對人的影響遠小于采集400cc的血量。        


4、儒百——專業細胞治療用細胞原材料解決方


我們提供通過單采機采集的單個核細胞成分,即Leuko Pak。Leuko Pak的主要成分:

1)Mononuclear Cells(PBMNC)

2)Red Blood Cells(RBC)

3)Plasma

4)Platelets


Leuko Pak產品優勢:

1)按照美國StemExpress的標準采集、運輸

2)提供Donor簽署的知情同意書

3)Donor病毒測試為陰性(HIV-1/2、HBV、HCV、梅毒)

4)每個批次的產品均提供COA

5)提供產品冷鏈運輸全程的溫控記錄

6)提供分離MNC的技術指導

7)可先對Donor進行預篩選

8)Donor基本均可以回召



    

No Worry about the Cell Again.

   

【About Us】--儒百   

1.健康人血液免疫學細胞

(1)PBMC及亞型(CD3,CD4,CD8,CD56,CD14等),serum,plasma;

(2)Cord Blood CD34+;

(3) Leukopak;

2.疾病患者血液免疫學產品(MNC,Serum, Plasma

(1)自免疫疾?。?/span>SLE, RA等)

(2)癌癥(各類實體瘤及血液瘤—ALL,AML,CLL,CML,MM,HL,HNL

(3)糖尿?。?/span>DB1, DB2

3.猴子(食蟹猴,獼猴,恒猴)血清,血漿;

4.PDX模型;

5.陽性對照抗體——Anti-PD1, Anti-PDL1,Anti-CD47,Anti-Tigit,Anti-Lag3,Anti-Tim3等;

6.陰性對照抗體——Anti-HEL(與人源無交叉污染,Fc段可定制化);

7.重組靶點蛋白——5mg,10mg,20mg,100mg等大批次產品,效期久,大大降低采購成本;   


血液免疫細胞介紹:

一文解讀PBMC:藥物研發的最佳搭檔

一次提取10000000000的PBMC.......把人抽干的節奏????。?!

如何選擇新鮮及冷凍PBMC?

How Fresh Are Your PBMC?

抗體依賴細胞毒作用(ADCC)

一文解讀DC:最佳的抗原遞呈細胞

一文解讀T細胞激活機制及CART基于此的演變歷程

一文解讀T細胞家族

免疫細胞靠什么識別“敵人”:胞外受體介紹

創新工程抗體全景圖譜

食蟹猴樣本(PBMC,血漿,血清等)的體外應用簡介


腫瘤免疫治療相關介紹:

雙抗在腫瘤免疫中的介紹

腫瘤碰上免疫:腫瘤免疫循環

免疫檢查點藥物副作用(irAEs)機制及特點

腫瘤微環境中的免疫細胞及作用機理

人體自帶的免疫系統“緊箍咒”

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通用CAR-T,CAR-T與TCR-T面面觀

從癌細胞的角度看如何抑制免疫細胞的識別和殺傷

靶向藥物、免疫藥物,哪個更好?


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